來源：寶創(chuàng)日期：2021-09-07(980)
1、新冠疫情未散，結(jié)核仍須警惕
新冠疫情仍在全球肆虐，而另一個肆虐幾千年的慢性呼吸道傳染病-結(jié)核病也需高度警惕，這個無情的“白色瘟疫“至今仍是全球傳播最廣泛和致死率最高的傳染病之一，中國每年結(jié)核發(fā)病數(shù)是新冠肺炎患者（2020年總數(shù)）的十倍左右。世界衛(wèi)生組織(WHO)發(fā)布的《2020年全球結(jié)核病報告》指出，結(jié)核病目前是全球?qū)е滤劳龅氖笤蛑?，?007年以來一直位居單一傳染性疾病死因之首。2019年，全球新發(fā)結(jié)核病患者約996萬人，發(fā)病率為130/10萬。中國結(jié)核病新發(fā)患者數(shù)為83.3萬人，占比8.4%，居全球結(jié)核病高負(fù)擔(dān)國家中的第3位[1]。
圖1 2019年全球結(jié)核病數(shù)據(jù)
新型冠狀病毒大流行之下，衛(wèi)生服務(wù)受到干擾，發(fā)現(xiàn)和治療結(jié)核患者人數(shù)下降。對肺結(jié)核患者治療和督導(dǎo)管理也帶來了明顯影響，最令人擔(dān)心的是，肺結(jié)核患者因不能及時就診而導(dǎo)致治療中斷，特別是耐多藥肺結(jié)核患者，引起結(jié)核病死亡人數(shù)將升高。有可能逆轉(zhuǎn)2019年底前全球減輕結(jié)核病負(fù)擔(dān)所取得的進(jìn)展，2035年終止結(jié)核病流行的目標(biāo)也將面臨挑戰(zhàn)。
2、結(jié)核潛伏性感染急需早期識別、檢測和預(yù)防治療
結(jié)核病是由結(jié)核分枝桿菌（M. tuberculosis,MTB）引起的感染，引起結(jié)核原發(fā)性感染后，僅有少數(shù)患者出現(xiàn)急性癥狀，多數(shù)患者（95%）的原發(fā)感染是無癥狀的，隨后進(jìn)入潛伏性結(jié)核感染（LTBI）的休眠期狀態(tài)。潛伏性感染人群的數(shù)量龐大且隱秘，全球結(jié)核潛伏感染人群接近20億，在中國，結(jié)核潛伏感染者約為3.5億[2，3]。
圖2 結(jié)核潛伏感染人群如同海面之下的龐大“冰山”
LTBI 人群是一個龐大的潛在患者庫，約 5%～10%的人會在一生中發(fā)展成為活動性結(jié)核病患者，成為新的結(jié)核病傳染源。加強潛伏期結(jié)核人群的篩查和治療以阻斷潛伏感染者轉(zhuǎn)化進(jìn)展為活動性感染者，則發(fā)病率的下降速度會遠(yuǎn)超僅單獨治療活動性結(jié)核。既往研究表明，針對LTBl人群開展預(yù)防性治療可以實現(xiàn)60％～90％的保護(hù)效果[2]。為此我國也發(fā)布了《遏制結(jié)核病行動計劃（2019-2022年）》、《中國結(jié)核病預(yù)防控制工作技術(shù)規(guī)范(2020年版)》都將結(jié)核病預(yù)防性治療作為結(jié)核病綜合防治的重要組成部分[4，5]。針對肺結(jié)核的密切接觸者、HIV感染者等高危人群開展結(jié)核潛伏感染檢測和預(yù)防性治療是實現(xiàn)“終止結(jié)核病策略“的重要手段[4，6]。
3、結(jié)核檢測方法
目前，臨床診斷結(jié)核病除了結(jié)合臨床癥狀和病史資料外，還依靠影像學(xué)檢查、病原學(xué)診斷（涂片鏡檢、細(xì)菌培養(yǎng)、分子生物學(xué)檢測）、免疫學(xué)檢查（結(jié)核菌素皮膚試驗（TST）、結(jié)核γ干擾素釋放試驗（TB-IGRAs））等方法進(jìn)行輔助檢查,見表1[7，8]。
表1 結(jié)核檢測方法比較
4、γ-干擾素釋放試驗（interferon-γ release assays，IGRAs）原理
IGRA通過檢測全血或分離自全血的單核細(xì)胞在MTB特異性抗原早期分泌抗原靶6(ESAT-6) 和培養(yǎng)基濾過蛋白-10(CFP-10)刺激下產(chǎn)生的γ-干擾素，判斷受試者是否感染結(jié)核分枝桿菌。目前較成熟的IGRA方法有2 種，其對應(yīng)的方法和試劑盒已先后被美國FDA、我國NMPA批準(zhǔn)應(yīng)用于臨床。
（1）采用酶聯(lián)免疫吸附試驗（ELISA）、免疫熒光層析法、化學(xué)發(fā)光法檢測全血中致敏T細(xì)胞再次受到 MTB 特異性抗原刺激后釋放的 γ-干擾素水平，稱之為全血檢測或結(jié)核感染 T細(xì)胞免疫檢測。
（2）采用酶聯(lián)免疫斑點技術(shù)（ELISPOT）測定在 MTB 特異性抗原刺激下，計數(shù)外周血單個核細(xì)胞中能夠釋放γ-干擾素的效應(yīng)T細(xì)胞數(shù)量，稱之為細(xì)胞檢測或結(jié)核感染 T細(xì)胞檢測[9]。
圖3 γ-干擾素釋放試驗原理示意圖
? 基于特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)，具有高靈敏度，結(jié)核感染檢出率達(dá)到85%以上，可用于潛伏感染的檢測，有效提高早期感染檢出能力；
? 采用結(jié)核分枝桿菌特異性抗原，排除卡介苗接種的影響，同時可鑒別非結(jié)核分枝桿菌肺部感染與肺結(jié)核；
? 全血樣本體外檢測，肺內(nèi)結(jié)核與肺外結(jié)核都可檢測，檢測過程更安全；
? 采用定量檢測系統(tǒng)，結(jié)果客觀易判讀，適用于治療效果跟蹤及潛伏性感染篩查的首選；
5、IGRAs臨床應(yīng)用
1）結(jié)核感染的輔助診斷
結(jié)核病例的發(fā)現(xiàn)和及時治療是結(jié)核病控制的基石，國內(nèi)多數(shù)文獻(xiàn)報道的IGRAs敏感度和特異度在70%以上，優(yōu)于TST，檢出陽性率也明顯高于涂片、菌培等常規(guī)檢測方法，可用于不明原因發(fā)熱病人的結(jié)核或癥狀相似的其他肺部疾病的鑒別診斷。我國肺結(jié)核患者中菌陰肺結(jié)核所占比例較高，IGRAs在活動性結(jié)核尤其在菌陰結(jié)核病中具有診斷價值?！鼎?干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用》建議：IGRAs不能用于確診或排除活動性結(jié)核病，但對缺少細(xì)菌學(xué)診斷依據(jù)的活動性結(jié)核?。ㄈ缇幏谓Y(jié)核等），IGRAs 可在常規(guī)診斷依據(jù)的基礎(chǔ)上，起到補充或輔助診斷的作用[9,10]。
2）輔助診斷肺外結(jié)核
肺外結(jié)核屬于多系統(tǒng)、多臟器、多部位的結(jié)核病變，如淋巴結(jié)、骨、泌尿生殖等結(jié)核，近年來的患者數(shù)量呈逐年上升趨勢。診斷受到臨床樣本獲取相對困難、肺外結(jié)核含菌量少等原因無法獲得病原學(xué)或病理確診，IGRAs臨床樣品容易獲取，并且在肺外結(jié)核的診斷中具有較高靈敏度[10,11]。
3）篩查潛伏性結(jié)核感染
LTBl既無結(jié)核病相關(guān)癥狀，也沒有細(xì)菌學(xué)和影像學(xué)方面的結(jié)核活動證據(jù)。目前對LTBI的診斷多為間接，依賴于機體對MTB抗原所產(chǎn)生的特異性免疫反應(yīng)的檢測[2]。WHO 強烈推薦 IGRAs 應(yīng)當(dāng)在部分資源條件許可的高收入和中高收入國家用于檢測LTBI[10]?！鼎?干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用》建議：TST與IGRAs均可用于LTBI 的診斷和追蹤，若考慮到TST試驗檢測結(jié)果可能受卡介苗接種或非結(jié)核桿菌影響時，可對TST試驗陽性者進(jìn)一步采用IGRAs 幫助確認(rèn)[9]。
對潛伏感染的高危人群，擴大進(jìn)行主動篩查的覆蓋面，包括：肺結(jié)核患者的密切接觸者、≥65歲老年人、糖尿病患者、吸煙者、醫(yī)務(wù)工作者等高危人群。類風(fēng)濕關(guān)節(jié)炎等自身免疫性疾病和器官移植患者在接受糖皮質(zhì)激素或 TNF-α拮抗劑治療可導(dǎo)致免疫功能缺陷，這類患者也是 LTBI發(fā)展為結(jié)核病的高風(fēng)險人群，有必要用IGRAs進(jìn)行篩查LTBI[4，9]。另外HIV感染是 LTBI進(jìn)展為活動性結(jié)核病的高危因素，臨床上應(yīng)用IGRAs對 HIV 感染人群進(jìn)行 LTBI 篩查非常重要，IGRAs的陰性值可較好地排除MTB感染，避免艾滋病患者在治療過程中發(fā)生結(jié)核病[9]。
6、產(chǎn)品信息
寶創(chuàng)生物推出新品：結(jié)核分枝桿菌特異性細(xì)胞免疫反應(yīng)檢測試劑盒（熒光免疫層析法），已獲國家藥品監(jiān)督管理局三類醫(yī)療器械注冊證。本試劑盒基于IGRAs原理，通過免疫熒光層析定量檢測IFN- γ，判斷結(jié)核感染情況。經(jīng)廣州市胸科醫(yī)院、湖南省胸科醫(yī)院、湖北省人民醫(yī)院、武漢市肺科醫(yī)院等多家知名?？婆c綜合三甲醫(yī)院進(jìn)行了大規(guī)模驗證，結(jié)果可靠、與臨床診斷符合性高，獲得了上述醫(yī)院的好評和認(rèn)可。
優(yōu)勢
寶創(chuàng)生物結(jié)核IGRA檢測方案與其它方法的對比：
配套寶創(chuàng)生物的桌面型免疫熒光定量檢測平臺，打造全新的結(jié)核感染細(xì)胞免疫檢測方案，尤其匹配BCG廣泛接種的中國國情，適應(yīng)各級醫(yī)療單位裝備和應(yīng)用，充分發(fā)揮小巧便捷、操作便捷、取樣方便、抗干擾強、結(jié)果客觀、單人份試劑等優(yōu)勢，助力國家實現(xiàn)“十三五”結(jié)核病防治規(guī)劃策略中提出的2035年遏制和終止結(jié)核病的流行。
參考文獻(xiàn)：
[1] World Health Organization.Global tuberculosis report 2020.?Geneva: World Health Organization,2020.
[2] 李果, 龐先瓊, 徐華,等. 潛伏性結(jié)核感染診治進(jìn)展[J]. 中國防癆雜志 2021年43卷1期, 91-95頁, ISTIC CA, 2021.
[3]佚名. HIV合并結(jié)核分枝桿菌感染診治專家共識[J]. 中華臨床感染病雜志, 2017(2).
[4] 中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會．《遏制結(jié)核病行動計劃（2019-202年）．國衛(wèi)疾控發(fā)﹝2019﹞41號?．2020- 05-31．
[5] 中華人民共和國國家衛(wèi)生健康委員會．中國結(jié)核病預(yù)防控制工作技術(shù)規(guī)范(2020年版)．國衛(wèi)辦疾控函[2020]279號．2020- 04-02．
[6] 高磊, 金奇. 關(guān)口前移:再談結(jié)核分枝桿菌潛伏感染管理和暴露后干預(yù)[J]. 中國防癆雜志 2021年43卷3期, 201-203頁, ISTIC CA, 2021.
[7] 吳弟梅綜述, 陽萍審校. 結(jié)核病檢查方法的研究進(jìn)展[J]. 國際檢驗醫(yī)學(xué)雜志, 2015(1):106-107.
[8] 李觀華, 陳雪禮, 劉曉峰,等. 結(jié)核分枝桿菌6種檢測方法的比較分析[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué), 2020, v.26;No.565(14):68-70.
[9] 《中華結(jié)核和呼吸雜志》編輯委員會?中華醫(yī)學(xué)會結(jié)核病學(xué)分會. γ-干擾素釋放試驗在中國應(yīng)用的建議[J]. 中華結(jié)核和呼吸雜志, 2014, 37(010):744-747.
[10] 史培, 徐凱進(jìn). γ-干擾素釋放試驗在結(jié)核病診斷中的應(yīng)用及進(jìn)展[J]. 醫(yī)療裝備, 2019, 032(017):196-200.
[11] 朱洪柱. γ干擾素釋放試驗與結(jié)核菌素試驗在肺外結(jié)核臨床診斷中的價值對照研究[J]. 當(dāng)代醫(yī)學(xué), 2020, v.26;No.584(33):83-85.
